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酶标仪酶免分析七大步骤
更新时间:2015-10-23 点击次数:2282次
2、在标准品孔中加入50l各标准品溶液,酶标仪在各样品孔中加入50l样品溶液。
3、在所有孔中加入50l的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。
4、小心揭开盖板膜,甩干孔中液体,用稀释好的洗涤液(250μl/孔)充分洗涤微孔板3次,在吸水纸上拍干(拍干后未清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
5、酶标仪在所有孔中加入100l的酶标二抗,酶标仪用盖板膜封板,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光反应30分钟。取出酶标板,按步骤4洗板5次。
6、洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50l底物液A,再加50l底物液B,轻微晃动反应板使之*混匀,25℃环境避光显色15分钟(在颜色浅的情况下可适当延长反应时间,但总显色时间不要超过30分钟)。
7、每孔中加入50l终止液,轻轻晃动使之*混匀,在450nm(建议使用双波长450/630nm)下检测吸光度,结果在5分钟内读取。